一、专性厌氧菌的介绍
根据细菌生长对氧的需求，可分为专用需氧菌、兼性厌氧菌、专用厌氧菌和微需氧菌四类。
专用厌氧菌需要在严格的无氧气体环境中生长，氧气会对细菌产生毒性作用。一些厌氧菌在含有5%-10%二氧化碳的气体环境中可以耐受低浓度氧气。常见的专用厌氧菌有梭菌(如产气荚膜梭菌、肉毒梭菌、破伤风梭菌、困难梭菌等。)、双歧杆菌(如婴儿双歧杆菌、动物双歧杆菌等。)、拟杆菌、梭菌、厌氧消化链球菌等。
二、厌氧培养环境的构造
（1）用厌氧盒进行通风培养。有些厌氧箱可以同时进行微生物操作，如接种箱，直接培养，操作简便，成功率高，缺点是大多数实验室不具备，损耗大，对于小规模的培养试验，费用较高。
（2）使用厌氧罐、厌氧盒或厌氧培养袋+厌氧气袋，可在小或中空间制作厌氧环境，操作方便，无需任何复杂的专用设备，可在所有实验室使用，非常适合实验室中小型试验操作。
注：培养基必须与厌氧环境气体循环，如试管、锥形瓶等容器，以确保塞的透气性；培养平板容器时，必须确保平板容器具有良好的透气性，不能用密封膜密封缠绕。
（3）液体培养基可采用覆盖石蜡隔离氧气的方法，如泡肉培养基、梭菌增菌培养基等。培养基配制分装后，在培养基上方覆盖约0.5-1cm厚的液体石蜡，然后进行灭菌，无需使用厌氧培养箱或厌氧罐即可直接培养厌氧菌。
注：消毒前将石蜡覆盖，在灭菌过程中，培养基中溶解的氧气逸出，冷却后石蜡将阻碍空气中氧气的进入，可以较好地制造厌氧环境；培养基中还可补充一定量的还原性铁粉或硫乙醇酸钠、半胱氨酸等还原性成分，帮助维持厌氧环境。
（4）有些培养基不需要厌氧培养就能自然形成厌氧环境，如硫乙醇酸盐流体培养基。静置过程会自发分层，下层为无氧环境，无需任何厌氧设备或液体石蜡即可培养厌氧菌。
三、常见厌氧菌的培养基
1.硫乙醇酸盐流体培养基
该培养基常用于梭菌的活化和增菌培养，也可用于一些营养要求较高的厌氧菌的培养。该培养基的静置过程将自发分层，下层为无氧环境，无需任何厌氧设备或液体石蜡即可培养厌氧菌。
2.疱肉培养基
与硫醇酸盐液培养基相比，这种培养基用液体石蜡覆盖培养的梭菌能存活较长的时间(例如生孢梭菌，在硫醇酸盐液培养基中仅能存活几天，而在疱肉培养基中能存活几个月)。
3.改良GAM培养基
这种培养基营养十分丰富，适合绝大多数厌氧菌的培养，尤其是较难培养的营养性苛刻细菌(如拟杆菌)。
4.血平板/CDC厌氧菌琼脂
它营养丰富，适合绝大多数厌氧细菌的培养(可培养梭菌、拟杆菌等)。
5.MRS琼脂/肉汤
制备 MRS肉汤液培养液澄清透明，不沉淀，常用于乳酸菌或双歧杆菌的活化、增菌和采集菌体。
四、注意事项
（1）培养基的制备
覆有石蜡的液体培养基，在灭菌之前，应将液体石蜡包裹起来；流体培养基或半固体培养基在有氧条件下培养厌氧菌时，可用沸水浴或其它除氧方法将溶解的氧气排出。
（2）操作过程
由于氧气对厌氧菌有毒，整个操作过程应在专用无氧设备中进行。如果在正常空气中操作，从厌氧菌暴露在空气中到厌氧环境培养结束，整个过程应尽可能快，一般不超过15分钟，暴露时间越长，厌氧菌越容易死亡。
（3）培养环境
厌氧环境可以通过厌氧罐、厌氧培养箱、厌氧气包等方式提供。除了保证气体环境无氧外，一些厌氧菌通常需要5%-10%的二氧化碳、氢等气体来促进生长，提高厌氧菌对氧气的耐受性，更容易成功培养。
